Segmentação é o recurso de inteligência para a criação de público alvo de disparo, indo bem mais além do trabalho exclusivo com Lista de Assinantes, já que estas não permitem separar pessoas de acordo com categorias que você mesmo possa definir quais são, a exemplo de criar subgrupos de pessoas em função de seus dados em cadastro, como agrupar apenas pessoas de um dado estado, cidade, sexo, idade, etc., o que chamamos de segmentar por dados cadastrais.
Também há a possibilidade de segmentar em função de dados comportamentais dos inscritos, criando subgrupos de pessoas que, por exemplo, abriram ou deixaram de abrir uma dada campanha previamente enviada, podendo precisar há quanto tempo atrás as aberturas ocorreram e até mesmo quantas vezes a abertura foi realizada, entre outras possibilidades.
Crie regras distintas, combine-as com operadores lógicos, acesse tabelas de bancos de dados, escolha listas como fonte de dados da segmentação, trabalhe com a data de cadastro das pessoas, dados de navegação de inscritos, etc.